凯氏定氮法是目前测定食品和饲料中氮和蛋白质含量常用的方法,具有较高的精密度和重现性,且应用简单。现代凯氏定氮法是在400℃以上的消化温度下,在硫酸和硫酸盐的沸腾混合物中催化支持有机物质矿化的过程。在此过程中,有机结合氮转化为硫酸铵。碱化消化后的溶液释放出氨气,氨气经定量蒸汽蒸馏后用滴定法测定。
样 品:
液态牛牛奶,全脂及巴氏杀菌
蛋白标签值:3.35 g/100 ml,文献中酪蛋白含量:2.66%
仪 器: 意大利VELP凯氏定氮仪 UDK 159 +消化炉DKL 20
实验结果:
以滤液(V滤液)体积乘0,4为样本量,计算非酪蛋白氮(NCN)的结果为氮的百分比。其计算公式如下:NCN% = mg N / [(G milk/V sol) x 1000 x V filtrate] x 100
G牛奶=牛奶重量(20克)
V sol= 含所有分离所需化学物质的牛奶溶液,容量(50毫升)
V滤液=用于进行1分析的滤液(ml)
对全脂牛奶的修正系数0.994(半脱脂牛奶的修正系数为0.998)进行了输出和相乘。计算酪蛋白时考虑到全脂牛奶中测定的总氮含量(Ntot)为0.525%。(关于Ntot,请参阅应用说明“牛奶中N/蛋白含量测定采用凯氏定氮法")
以含28 mg氮的5 ml甘氨酸标准溶液(3%)为对照品,对整个过程进行验证。所得回收率在98% ~ 102%之间,符合预期范围。所得结果与预期值相符,可靠,重现性好,相对标准偏差低(RSD < 1%),结果重复性好。
研究意义:
酪蛋白含量由牛奶中总氮(Ntot)含量与非酪蛋白氮(NCN)含量的差值决定,该差值按本文所述程序计算。 牛奶蛋白是古老和广泛食用的食物蛋白。目前,人们对这些物质在营养领域和技术应用方面都有很大的兴趣。酪蛋白是一种参与奶酪和发酵牛奶生产的蛋白质家族。它们不仅是乳制品生产中非常重要的氮化合物,而且是医药中的添加剂,在化妆品、油漆和粘合剂中都有技术用途。